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mypols Volcano2G DNA聚合酶

更新時(shí)間:2020-07-03      點(diǎn)擊次數(shù):1510

mypols Volcano2G DNA聚合酶

 

 Volcano2G DNA polymerase

Volcano2G DNA聚合酶

€95,00

  •  
  • Volcano 2G是原始Volcano DNA聚合酶的高級版本,具有進(jìn)一步改善的逆轉(zhuǎn)錄活性。該酶是一種經(jīng)過工程改造的,極耐熱的逆轉(zhuǎn)錄酶和結(jié)合的DNA聚合酶,可通過定向的人工進(jìn)化獲得。Volcano2G DNA聚合酶可直接從RNA模板(無需等溫逆轉(zhuǎn)錄步驟)直接促進(jìn)“零步” RT-PCR,因?yàn)樵谘h(huán)PCR延伸步驟中逆轉(zhuǎn)錄與DNA擴(kuò)增同時(shí)進(jìn)行。這還允許在高溫下進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng),從而大程度地減少了在高溫下融化的RNA中強(qiáng)大的二級結(jié)構(gòu)所遇到的問題。

 

Volcano2G DNA聚合酶包含熱啟動劑配制的,具有逆轉(zhuǎn)錄酶活性的工程穩(wěn)定的熱穩(wěn)定DNA聚合酶和穩(wěn)健的Taq DNA聚合酶的酶混合物。基于適體的熱啟動劑設(shè)計(jì)用于在低溫下(例如,在移取反應(yīng)混合物時(shí))阻斷非特異性DNA聚合酶活性,但會在高于50-55°C的溫度下分解,從而釋放出現(xiàn)已*活化的DNA聚合酶。

Volcano2G DNA聚合酶作為5 U / µl甘油庫存與適當(dāng)?shù)?x Volcano反應(yīng)緩沖液一起運(yùn)輸,該緩沖液針對60-300 bp的擴(kuò)增子進(jìn)行了優(yōu)化。

Volcano2G逆轉(zhuǎn)錄酶可以可靠地從≥1 ng總RNA輸入中檢測RNA靶標(biāo)。它不需要Mn 2+即可  獲得活性。但是,可以通過向反應(yīng)中添加Mn 2+來進(jìn)一步優(yōu)化某些檢測方法(建議范圍為0.5-1 mM,未提供Mn 2+)。

 

該產(chǎn)品以涼爽包裝出售。建議在到達(dá)-20°C時(shí)存放產(chǎn)品。

 

 

RT-PCR活性:已對 Volcano3G RT-PCR Mix進(jìn)行了成功的RT-PCR性能測試。在實(shí)時(shí)PCR循環(huán)儀中從人總RNA提取物中擴(kuò)增出一個(gè)151 bp的片段(HPRT1 mRNA),并可視化為單個(gè)擴(kuò)增產(chǎn)物。

DNA聚合酶活性:使用人工DNA模板和DNA引物監(jiān)測Volcano3G DNA聚合酶活性并將其調(diào)整為特定的DNA聚合酶活性。
酶濃度通過蛋白質(zhì)特異性染色確定。

 

 

帶有“ 0步”方案的便捷RT-PCR

零步協(xié)議節(jié)省時(shí)間

跳過逆轉(zhuǎn)錄步驟。不需要等溫逆轉(zhuǎn)錄步驟。 

Volcano2G是一種具有PCR活性的逆轉(zhuǎn)錄酶,非常穩(wěn)定,在95°C下的半衰期> 40分鐘。

靈敏的RNA檢測

當(dāng)添加實(shí)時(shí)PCR染料時(shí),Volcano2G DNA聚合酶也可用于實(shí)時(shí)PCR。Volcano2G具有Taq DNA聚合酶樣核酸酶結(jié)構(gòu)域,使其也適用于基于水解探針的分析。如此處所示,通過使用基于探針的qPCR分析和零步RT-PCR方案,使用總RNA的10倍稀釋系列檢測了NONO mRNA。

來自細(xì)胞的直接RT-PCR

為了可靠地進(jìn)行細(xì)胞RNA的RT-PCR,樣品制備步驟*。然而,這些步驟費(fèi)力,費(fèi)時(shí)并且需要額外的消耗品。使用我們的VolcanoCell2G RT-PCR 2x預(yù)混液,您可以用快速便捷的“零步長”方案代替費(fèi)力的RNA制備。

節(jié)省時(shí)間和金錢

VolcanoCell2G RT-PCR 2x預(yù)混液具有簡化的“零步驟”工作流程,使您能夠規(guī)避費(fèi)力的純化和提取步驟,從而節(jié)省了時(shí)間和金錢。

出色的靈敏度

VolcanoCell2G RT-PCR 2x實(shí)現(xiàn)了低至單個(gè)細(xì)胞的檢測靈敏度。在此示例中,按照VolcanoCell2G協(xié)議從單個(gè)隆德人中腦(LUHMES)細(xì)胞中檢測到GAPDH mRNA。

 

具有更多示例的出版物可以在“出版物”部分中找到。

 

 

 

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