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Fluoro AChE檢測(cè)試劑盒

發(fā)布時(shí)間:2017/5/16      點(diǎn)擊次數(shù):1452
貨號(hào)品名規(guī)格2017年價(jià)格
AChE 100-2Fluoro AChE - 100 tests100 Tests7225

產(chǎn)品描述:

保存溫度:2-8度

主要優(yōu)點(diǎn):

  • 無(wú)需放射性物質(zhì)。
  • 應(yīng)用 - 流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡。
  • 檢測(cè)細(xì)胞水平的細(xì)胞溶解活性。
  • 適用于多種類型的哺乳動(dòng)物細(xì)胞系。

技術(shù)

測(cè)量CMC / ADCCzui常用的方法是放射性鉻-51(51Cr)釋放試驗(yàn)(2)。該測(cè)定有幾個(gè)缺點(diǎn):昂貴的,難以加載某些細(xì)胞類型,由于嚴(yán)格的環(huán)境規(guī)定而處置昂貴,并且具有51Cr自發(fā)釋放的高背景。使用流式細(xì)胞儀,現(xiàn)在可以消除對(duì)放射性物質(zhì)的需要,并增加在單個(gè)細(xì)胞基底上定量細(xì)胞溶解活性的能力。各組已經(jīng)證明通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)測(cè)量CMC / ADCC活性與傳統(tǒng)的51Cr釋放測(cè)定(3,4,5,6)具有強(qiáng)烈(95%)的相關(guān)性。

測(cè)定原理

細(xì)胞跟蹤染料CFSE(7,8,9)用于標(biāo)記靶細(xì)胞群體。在測(cè)定完成實(shí)驗(yàn)方案后,加入7AAD(活/死)(10,11)以測(cè)量細(xì)胞死亡。7AAD僅進(jìn)入膜受損細(xì)胞并與DNA結(jié)合。

流式細(xì)胞術(shù)用于門靶細(xì)胞并測(cè)量7AAD陰性對(duì)7AAD后細(xì)胞。%細(xì)胞毒性通過(guò)以下等式計(jì)算(參見(jiàn)下面的實(shí)驗(yàn)例):

7AAD正(右上象限)= R1 / 7AAD Postitve(右上象限)= R1 + 7AAD負(fù)(右下象限)= R2 ×100 
ACT1

為了測(cè)試豬gd淋巴細(xì)胞的自然殺傷能力,將K562細(xì)胞染色并調(diào)整至含有10%FBS的1×10 4個(gè)細(xì)胞/100μlPRMI的終濃度。以25:1,50:1和100:1的E / T比加入gd淋巴細(xì)胞,調(diào)節(jié)至400μlRPMI的總體積,然后在37℃,無(wú)菌封蓋的面管中孵育4小時(shí)。孵育后,將活/死染色劑直接加入每個(gè)管中,在冰上孵育15分鐘并通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)分析。

引用文獻(xiàn)

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